等度高效液相色譜儀是一種基于液相色譜法原理設(shè)計的分析儀器，通過高壓泵將流動相（如甲醇、乙腈等）以恒定流速泵入色譜柱，樣品溶液經(jīng)進樣器注入后，隨流動相進入色譜柱。由于樣品中各組分在固定相（如C18、硅膠等）和流動相之間的分配系數(shù)不同，在色譜柱內(nèi)經(jīng)歷反復(fù)的吸附-解吸過程，導(dǎo)致移動速度產(chǎn)生差異，從而實現(xiàn)分離。分離后的組分依次流入檢測器（如紫外檢測器、熒光檢測器等），被轉(zhuǎn)化為電信號并傳輸至記錄儀，最終以色譜圖的形式呈現(xiàn)，用于定量分析樣品中的組分含量。
等度高效液相色譜儀其核心原理是通過固定比例的流動相實現(xiàn)樣品分離，適用于對分離條件要求相對穩(wěn)定的分析場景。以下是其具體應(yīng)用范圍及分析：
一、醫(yī)藥領(lǐng)域：藥物研發(fā)與質(zhì)量控制的基石
藥物成分分離與純度檢測
等度HPLC可高效分離藥物中的活性成分、輔料及雜質(zhì)，通過紫外檢測器（UV）或二極管陣列檢測器（DAD）定量分析，確保藥物純度符合標(biāo)準(zhǔn)。例如，抗生素發(fā)酵液中主體產(chǎn)物與副產(chǎn)物的分離，或冬凌草甲素（抗癌成分）在血清中的含量測定。
優(yōu)勢：等度條件簡化了方法開發(fā)流程，適合大批量樣品篩查，降低研發(fā)成本。
藥代動力學(xué)研究
結(jié)合質(zhì)譜檢測器（MS），等度HPLC用于測定藥物在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物分布及濃度變化，為新藥效能評估提供數(shù)據(jù)支持。例如，依那普利在人體血漿中的生物利用度研究。
雜質(zhì)鑒定與質(zhì)量控制
通過等度洗脫，可快速定位藥物中的降解產(chǎn)物或工藝雜質(zhì)，滿足藥典（如美國藥典22版）對含量測定的嚴(yán)格要求。
二、食品科學(xué)：守護舌尖上的安全
營養(yǎng)成分分析
等度HPLC可定量檢測食品中的碳水化合物、維生素、蛋白質(zhì)及氨基酸等關(guān)鍵成分。例如，乳制品中乳糖與蛋白質(zhì)的分離，或果汁中維生素C的含量測定。
添加劑與污染物監(jiān)測
針對食品中的添加劑（如防腐劑、甜味劑）、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留及真菌毒素（如黃曲霉毒素），等度HPLC通過優(yōu)化色譜柱與流動相比例，實現(xiàn)高效分離與靈敏檢測。例如，歐盟標(biāo)準(zhǔn)中牛奶中抗生素殘留的篩查。
非法添加物排查
結(jié)合熒光檢測器（FLD），等度HPLC可檢測食品中的非法添加劑（如蘇d紅、三聚氰胺），保障食品安全。
三、環(huán)境監(jiān)測：污染物的精準(zhǔn)追蹤
水體與土壤污染分析
等度HPLC適用于分析水質(zhì)中的多環(huán)芳烴（PAHs）、酚類、鄰苯二甲酸酯類等低揮發(fā)性有機污染物。例如，美國EPA531方法采用HPLC-熒光法測定飲用水中的N-甲基氨基甲酸酯殺蟲劑。
大氣顆粒物檢測
通過等度洗脫，可分離大氣中的多環(huán)聯(lián)苯、聯(lián)苯胺類化合物，評估空氣質(zhì)量對健康的影響。
固體廢棄物分析
結(jié)合LC/熒光技術(shù)，等度HPLC可檢測固體廢棄物中的多環(huán)芳烴，為污染治理提供依據(jù)。
四、化工與材料科學(xué)：工業(yè)生產(chǎn)的“質(zhì)量守門員”
石油化工產(chǎn)品分析
等度HPLC在油品分析中表現(xiàn)突出，可測定石油中的多環(huán)芳烴、重質(zhì)烴等成分。例如，采用正己烷、二氯甲烷為流動相，通過多維色譜技術(shù)實現(xiàn)烴族的精準(zhǔn)分離。
聚合物與添加劑檢測
針對塑料、橡膠等材料中的添加劑（如增塑劑、抗氧化劑），等度HPLC可快速分析其含量與穩(wěn)定性，優(yōu)化生產(chǎn)工藝。
工業(yè)廢水處理
結(jié)合電化學(xué)檢測器，等度HPLC可監(jiān)測廢水中的聯(lián)苯胺類化合物，評估處理效果，助力環(huán)保合規(guī)。
五、生命科學(xué)：探索微觀世界的“顯微鏡”
蛋白質(zhì)組學(xué)研究
等度HPLC常用于蛋白質(zhì)的預(yù)分離，結(jié)合雙向電泳技術(shù)，可分析基因表達時間、蛋白質(zhì)翻譯后修飾及亞細胞分布。例如，體積排阻色譜（SEC）作為第一向分離，為后續(xù)質(zhì)譜分析提供純化樣本。
代謝組學(xué)分析
通過等度洗脫，可分離生物樣本中的代謝產(chǎn)物（如氨基酸、有機酸），結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)揭示代謝途徑變化，為疾病診斷提供生物標(biāo)志物。
核酸與酶分析
等度HPLC可純化DNA、RNA片段，或分離酶類（如淀粉酶、蛋白酶），支持基因工程與生物催化研究。
